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细胞室是进行细胞培养的重要场所,细胞培养要求无菌操作,因此细胞室的建设布局、维护管理也就有别于一般的实验室。细胞培养的区域划分一般涉及以下几方面:无菌操作,细胞培养用液配制,细胞孵育,储存,清洗、包装和灭菌,对环境的要求严格,细胞培养区域的布局可以按照操作类型和洁净要求进行划分。
清洗、包装和灭菌工作在准备间中进行;细胞培养用液配制,储存,无菌操作及细胞孵育区在细胞室进行;准备间与细胞室相邻,以便进行物品传递。准备间无特殊要求,划分清洗、包装和灭菌三个区域即可;细胞室要求较高,一般都装有高效空气过滤装置及专业恒温恒湿空调系统以保证室内环境清洁,细胞室顶部装有紫外灯以便进行日常无菌维护,墙面也多为易于消毒灭菌的彩钢板。
细胞室的区域布局如下:
①日常服装存放区,用于存放外套、鞋、包等日常物品;
②洁净室鞋服存放区,用于更换细胞室专用洁净服、洁净鞋及佩戴口罩等,该区域顶部装有紫外灯,以便对日常维护洁净物品;
③风淋区,对洁净服外进行再次清洁,风淋区地面设有粘尘地垫,以保证除尘效果;
④洁净走廊,洁净走廊内设有传递窗,以便递送灭菌物品等,另外洁净走廊可通向培养室;
⑤培养室,细胞培养操作的区域,室内设有废液缸和消毒桶等。
细胞培养室内的设备一般包括超净台、细胞培养箱、离心机、液氮罐、倒置显微镜、冰箱、钢瓶等设备,这些设备应具备操作流程及注意事项,由专人维护。细胞培养室的日常监管主要包括操作员的操作技术,细胞培养试剂耗材,细胞培养室环境监控等内容。及时纠正在细胞培养过程中不正确操作;细胞培养用的试剂耗材按价值分为不同的管理类型,由不同的人员负责,保证制备工作顺利进行及避免浪费;细胞培养室内的环境监控主要是检查细胞培养室内空气的洁净程度及氧气浓度,因此细胞培养室内要定期采用沉降法测定菌落数量及配备氧浓度检测器。
细胞培养室的维护分为细胞培养室环境维护和细胞的维护。细胞培养室的环境维护分为“硬件”维护和“软件”维护两类,“硬件”维护主要是指定期检查、更换细胞培养室高效过滤系统、超净台过滤器、紫外灯管等设备配件;“软件”维护主要是指细胞培养室的值日安排、大扫除安排等。细胞的维护就是要规范细胞的储存,做好细胞的名称、数量、位置、储存日期、储存者等相关信息的记录存档工作,长期储存的细胞应取出复苏,以便检查细胞状态,定期检查液氮罐、超低温冰箱等细胞存储设备,确保设备能够正常运行。


P2实验室的定义
P2实验室是生物安全防护二级实验室,世界卫生组织(WHO)根据致病能力和传染的危险程度等,将传染性微生物划分为4类;根据设备和技术条件,将生物实验室也分为4级(一般称为P1、P2、P3、P4实验室),1级最低,4级最高。在现在各类实验室当中,P2实验室是使用为广泛的生物安全等级实验室。

级别        适用范围
 P1         实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物
 P2         适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物
 P3         适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素
 P4         适用于对人体具有高度的危险性,通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素

P2实验室建设设计依据
1.<医药工业洁净厂房设计规范>(1997年)
2.<洁净厂房设计规范>(1984)
3.<采暖通风与空气调节设计规范>(GBJ19-87)
4.<消毒管理办法>(卫生部1992)
5.甲方提供的实验室平面布置图等有关技术资料和要求

P2实验室要求
P2实验室主要用于其对象的危害等级为Ⅱ级(中等个体危害,有限群体危害),适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物。具体定义为“能引起人类或动物发病,但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病源体,代表病原体:流感病毒。实验室感染不导致严重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限”。

P2实验室的系统组成部分
1、实验室结构装修:
2、各实验间洁净度、压力梯度:
3、实验室气流组织方式:
4、空调系统:
5、实验室送排风系统:
6、房间压力显示、报警系统:
7、电子连锁系统:
8、风量自动控制系统:
9、防气流倒灌系统:
10、实验室物品进出:
11、实验室气体管道连接:
12、数据传输系统:
13、监控系统:
14、通讯系统:
15、门禁系统:
16、配电系统形式及配置:

P2实验室管理制度
1.只有经过授权的人员才允许进入P2实验室工作区。
2.16岁以下儿童禁止进入P2实验室工作区。
3.实验人员要接受相应预防性生物制品的免疫接种。
4.禁止将无关动物带入实验区。
5.外单位人员来访、参观、进修,必须经中心主管部门批准,未经批准不得进入P2实验室工作区。
6.外来人员进入P2实验室,须由本室人员陪同,在严格遵守有关规定的条件下方可进入,同时填写《外来人员进出实验室特殊区域登记表》。
7.严禁在实验室内吸烟、饮食、化妆等。

 
 

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