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DC 细胞的培养及鉴定

所属分类：大健康咨讯发布时间：2021-03-19

PBMC用无血清培养液调整浓度；
培养箱中孵育使单核细胞贴壁；
诱导单核细胞向DC 细胞分化；
对DC 进行抗原负载，诱导DC 细胞成熟；
收获DC 细胞，其数量应达到1×10的6次方/个以上；

活细胞比例检测；
形态学观察；
细胞表型分析：流式细胞术检测DC细胞表面CD14、HLA-DR、CD40、CD80、CD83 和CD86 等分子的表达，成熟的DC不表达CD14，而高表达其他分子。CD83是成熟DC 的特异性标志，在单核细胞和不成熟DC表面不表达或低表达。

无菌检测：收获细胞前取少量培养物进行细菌、真菌培养，并检测支原体、衣原体，均应为阴性；
内毒素检测：收获细胞前取少量培养物，回输前，用鲎试剂检测内毒素含量，标准：内毒素<0.5 EU/ml。

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